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微生物檢測的檢驗方法小結(jié)

更新時間:2014-10-13  |  點(diǎn)擊率:2646
     微生物檢測的檢驗方法
    微生物檢測方法一:沉降法
    將盛有培養(yǎng)基的平皿放在空氣中暴露一定時間,經(jīng)培養(yǎng)后計算出其上所生長的菌落數(shù)。此法簡單,使用普遍,由于只有一定大小的顆粒在一定時間內(nèi)才能降到培養(yǎng)基上,因此,所測得微生物數(shù)量欠準(zhǔn)確,檢驗結(jié)果比實際存在數(shù)量少,并且也無法測定空氣質(zhì)量,所以,僅能粗略計算空氣污染及了解被測趣味生物的種類。
    【檢驗方法】
    (1)將一直被好的營養(yǎng)瓊脂、查氏培養(yǎng)基及高氏1號三種平板置于待測地點(diǎn),打開皿蓋在空氣中暴露5~10min。
    (2)蓋上培養(yǎng)皿蓋,置于℃培養(yǎng)24~45h,根據(jù)平板上所生長的菌落數(shù)計算出1m?或1L空氣中的細(xì)菌總數(shù)。
    (3)計算,奧梅梁斯基認(rèn)為:在面積為100cm2平板瓊脂培養(yǎng)基表面上,5min降落的細(xì)菌數(shù)經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù)和10L空氣中所含的細(xì)菌數(shù)相當(dāng)。根據(jù)奧氏公式計算
    式中X—每1m?空氣中的細(xì)菌個數(shù);
    式中N—5min降落在平板上,經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù);
    式中r—平皿底半徑。
    經(jīng)測定發(fā)現(xiàn),用奧氏公式計算的浮游細(xì)菌數(shù)比實測的浮游細(xì)菌少。原因是此公式?jīng)]有考慮塵埃粒子大小、數(shù)量、氣流情況、人員密度和活動情況。
    微生物檢測方法二:撞擊法
    以縫隙采樣器為例,用吸風(fēng)機(jī)或真空泵江含菌空氣以一定流速穿過狹縫而被抽吸到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)及平板上。狹縫長度為平皿的半徑,平板與縫的間隙有2㎜,平板以一定的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)。通常平板轉(zhuǎn)動一周,取出置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)的48h,根據(jù)空氣中微生物的密度可調(diào)節(jié)平板狀動的速度。采集含菌高的空氣樣品時,平板轉(zhuǎn)動的速度要比含菌zui低的空氣樣品的轉(zhuǎn)速快。根據(jù)取樣時間和空氣流量算出單位空氣中的含菌量。采樣器的規(guī)格各國不一,可按說明書操作。
    微生物檢測方法三:過濾法
    該法是抽取定量空氣通過一種液體吸收劑,然后取此液體定量培養(yǎng)計數(shù)出菌落數(shù)。
    (1)將無菌的液體培養(yǎng)基或無菌水與真空泵相連,以每分鐘10L速度取空氣樣并劇烈震蕩,使阻流在液體中的氣溶膠或微生物均勻分散。
    (2)吸取上述含菌液體吸收液1mL與融化冰冷卻到45℃左右的營養(yǎng)液瓊脂做傾注培養(yǎng),同時做三個平行試驗,置37℃恒溫箱中培養(yǎng)48h,計算平均菌落數(shù)。根據(jù)下列公式計算
    式中X—每1m?空氣中的細(xì)菌數(shù);
    式中Vs—吸收液體量,mL;
    式中Va—空氣過濾量,L;
    式中N—每1mL液體培養(yǎng)基中的細(xì)菌數(shù)。
    微生物檢測方法四:簡易定量測定法
    用無菌注射器定量抽取空氣,將所取空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)部,經(jīng)培養(yǎng)后,即可定量、定性測定空氣中微生物,此法簡單易行。
    (1)將無菌固體培養(yǎng)基融化后,在50℃水浴中保溫備用。
    (2)利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100mL。
    (3)在無菌操作下,取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中,平皿稍作傾斜,將注射器插入培養(yǎng)基深處,緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi),輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固,置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)3d后統(tǒng)計菌落數(shù)量,推算1L空氣所含菌量。通過菌落形態(tài)定性微生物,如統(tǒng)計霉菌數(shù)量時培養(yǎng)的時間稍許延長。應(yīng)用此法需多做平行試驗,求其平均值以提高準(zhǔn)確性。
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